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Liquidation – La protéine du liquide céphalorachidien annonce la résolution de la méningite bactérienne

La – protéine, un liquide céphalo-rachidien LCF du marqueur de lésion neuronale qui a été récemment adopté pour le diagnostic de la maladie de Creutzfeldt-Jakob, se trouve également dans le LCR de patients atteints de divers troubles neurologiques Nous avons étudié prospectivement des patients consécutifs atteints de méningite bactérienne purulente. constaté que – la protéine a été détectée chez tous les patients à l’admission à l’hôpital Tous les patients ayant récupéré des protéines libérées du LCR avant leur sortie de l’hôpital ont été le premier marqueur du LCR à disparaître, alors que ceux décédés n’ont jamais éliminé la protéine

La sévérité de la maladie et l’évolution de la méningite bactérienne sont estimées par des mesures en série de marqueurs inflammatoires et métaboliques dans le LCR , mais aucun marqueur de lésion neuronale n’a jamais été adopté chez les patients atteints de cette maladie , une forme rapidement progressive de la démence appartenant aux encéphalopathies spongiformes transmissibles, la présence de – protéine dans le LCR a été trouvée avoir des propriétés diagnostiques in vivo significatives dans le cadre clinique approprié La présence de – dans le LCR est considérée comme résultent d’une perturbation neuronale et de la fuite de protéines cérébrales dans le LCR, et cette protéine a été retrouvée dans des échantillons de CSF provenant de patients présentant différentes pathologies neurologiques dont la caractéristique commune était la présence d’un certain degré de perte neuronale implique des limitations substantielles dans l’utilisation de la protéine en tant que marqueur spécifique de la MCJ, sa valeur en tant qu’indicateur des dommages neurologiques A partir de cette hypothèse, nous avons évalué prospectivement la présence de – protéine dans des échantillons de LCR obtenus chez des patients atteints de méningite bactérienne purulente. Patients et méthodes Tous les patients consécutifs un diagnostic microbiologiquement documenté de méningite bactérienne purulente admis dans notre service entre janvier et décembre ont été inclus dans l’étude et observés jusqu’à leur sortie ou leur mort. Les analyses d’échantillons de LCR comprenaient le nombre de cellules, la détermination biochimique, le niveau protéique total, la microscopie directe. frottis colorés, test d’antigène bactérien, test de latex et culture sur milieu aérobie. Un consentement éclairé a été obtenu de patients ou de parents. Des aliquotes de CSL de μL ont été mélangées à des volumes de méthanol glacé, maintenus à – ° C pendant h, puis centrifugés à pour min Le culot a été dissous dans μL de tampon d’échantillon% S DS,% β-mercaptoéthanol, EDTA mM,% de glycérol et Tris mM [pH,] et bouilli pendant min Pour chaque échantillon, μL l’équivalent de μL de CSF, μL et μL de tampon d’échantillon / puits ont été chargés sur un% gel de polyacrylamide et transféré sur des membranes de polyvinylidène difluorure Immobilon P; Millipore Membranes ont été incubées avec anti-β polyclonal lapin IgG Santa Cruz Biotechnology à une: dilution et révélé avec anti-lapin peroxydase de raifort IgG Amersham à une: dilution Les blots ont été développés en utilisant un système chimiluminescent amélioré Amersham valeurs densitométriques pour chaque échantillon ont été obtenu avec un scanner laser assisté par ordinateur GS- Calibrated Imaging Densitometry; BioRad, après correction pour le contexte La quantité totale de – protéine quantifiée à partir de chaque échantillon de LCR dilué et non dilué a été exprimée en unités arbitraires. Les échantillons de CSF de contrôle incluaient des échantillons provenant de patients présentant une hypertension intracrânienne bénigne et de patients présentant une hydrocéphalie normotendue. Streptococcus pneumoniae n =, Neisseria meningitidis n =, Staphylococcus aureus n = et Pseudomonas aeruginosa n = Chez les patients, méningite développée après chirurgie crânienne ou rachidienne La méningite due à S aureus chez les patients et P aeruginosa au traitement antibiotique empirique a été administrée à l’admission à l’hôpital et a été modifiée ultérieurement si nécessaire une fois que l’information sur l’étiologie et la sensibilité in vitro des isolats est devenue disponible. ngitis et patient avec méningite méningococcique sont morts; tous les autres patients se sont rétablis, sans séquelles neurologiques apparentes à des mois de suivi. Les paramètres du LCR relatifs à l’admission des survivants et des personnes décédées étaient les suivants: numération leucocytaire moyenne, ± et ± cellules / μL P, NS; niveau moyen de protéines totales, ± et ± mg / dL P, NS; et le niveau de glucose moyen, ± et ± mg / dL P, NSThe les résultats concernant la détermination de – protéine dans le CSF sont présentés dans la figure Tous les patients testés positifs à l’admission à l’hôpital Les patients qui ont survécu patients – effacés – protéines de leur CSF, alors que ceux qui sont morts n’ont jamais effacé la protéine

Figure Vue large Diapositive de téléchargementRésultats de la détermination du niveau de protéine dans les échantillons de liquide céphalorachidien obtenus chez des patients atteints de méningite bactérienne Haut, patients ayant survécu en bas, patients décédés Pour chaque patient, les ponctions lombaires réalisées sont représentées par des carrés; les carrés gris correspondent à des échantillons de LCR qui ont été testés positifs par le dosage – la quantification densitométrique est indiquée dans chaque carré, et les carrés blancs correspondent aux échantillons négatifs. Les barres horizontales représentent le nombre de jours entre les ponctions lombaires suivantes; où aucune barre n’est interposée entre les carrés consécutifs, les ponctions lombaires correspondantes ont été effectuées sur des jours consécutifs. Vue de la vue grandDownload slideRésultats de la détermination du niveau de protéine dans les échantillons de CSF obtenus chez les patients atteints de méningite bactérienne. chaque patient, les ponctions lombaires réalisées sont représentées par des carrés; les carrés gris correspondent à des échantillons de LCR qui ont été testés positifs par le dosage – la quantification densitométrique est indiquée dans chaque carré, et les carrés blancs correspondent aux échantillons négatifs. Les barres horizontales représentent le nombre de jours entre les ponctions lombaires suivantes; où aucune barre n’est interposée entre les carrés consécutifs, les ponctions lombaires correspondantes ont été effectuées sur des jours consécutifs chez des patients survivants -, une évolution bénigne simple a été observée, comme l’indique également le nombre d’échantillons de LCR obtenus chez ces sujets – ponctions lombaires Le premier échantillon de liquide céphalo-rachidien testé négatif pour la protéine n’a été suivi que par d’autres échantillons négatifs ou a coïncidé avec le dernier échantillon prélevé sur le patient. Les autres patients Chez ces patients, la protéine se comportait en conséquence: avant l’établissement définitif de la clairance finale, la protéine présentait une intermittence concordante à la fois avec les récidives cliniques transitoires et avec la la fluctuation des marqueurs inflammatoires du LCR Il est à noter que chez ces patients, une méningite bactérienne due à S aureus chez un patient et P aeruginosa chez un patient développé après chirurgie crânienne, qui prédispose les patients à la récidive Concernant la quantification de – protéine à l’admission, aucune différence significative n’a été trouvée entre survivants et ceux qui sont morts signifient ± SD, ± vs ± unités densitométriques; P, NS Une tendance vers des niveaux inférieurs avant la clairance a été observée chez tous les survivants, tandis que chez les patients décédés, le taux de protéine a augmenté avant la mort. Les valeurs des paramètres du LCR ont été enregistrées lors de la clairance les survivants, les patients – ou lors du dernier prélèvement avant les patients décédés – sont rapportés dans le tableau En aucun cas, le nombre de globules blancs et les niveaux de protéines n’ont été ramenés à des niveaux normaux au moment du dédouanement définitif chez les survivants

Tableau View largeTélécharger slideCSF résultats – niveau de protéines et les paramètres majeurs conventionnels enregistrés au moment de la finale – clairance des protéines chez ceux qui ont guéri de la méningite bactérienne – et à la dernière détermination avant la mort chez les patients décédés -Table Voir grandDownload slideCSF findings – niveau de protéines et paramètres majeurs conventionnels enregistrés au moment de la finale – clairance des protéines chez ceux qui ont guéri des patients atteints de méningite bactérienne – et à la dernière détermination avant la mort chez les patients décédés – Discussion chez les patients atteints de méningite bactérienne purulente aux paramètres du LCR testés couramment, nous avons mesuré en série la concentration de – protéine du LCR, le marqueur récemment adopté pour le diagnostic in vivo de la MCJ . La propriété la plus souhaitable pour un test à utiliser dans un contexte clinique est qu’elle fournit un D’après les résultats que nous avons enregistrés, – la protéine semble agir Les patients que nous avons étudiés ont eu un résultat positif à l’admission et tous ceux qui ont récupéré les protéines libérées du LCR avant d’être sortis de l’hôpital. Inversement, les patients mort jamais effacé – protéine de la propriété CSFA – de la protéine qui n’a jamais été cliniquement testée est le temps qu’elle nécessite pour être éliminée de la CSF Ceci a des incidences pertinentes dans ce cadre, car, en étant utilisé pour suivre l’évolution de une condition réversible, un marqueur de lésion tissulaire doit rapidement disparaître une fois que le processus dommageable a disparu. Comme on l’a vu chez les patients guéris, en particulier chez les patients ayant subi une neurochirurgie et ayant une disparition intermittente des protéines avant la clairance finale. établi, le temps de clairance de ce marqueur neuropathologique du LCR peut être aussi court que le jour, fournissant ainsi des informations en temps réel L’activité neurolytique de l’infection en coursIl est remarquable que, parmi les patients qui ont guéri, une persistance plus longue, ainsi que l’intermittence positive-négative-positive, du signal avant la clairance finale a été observée chez les sujets qui avaient une forme atypique de la méningite post-méningitique et de la plus longue évolution clinique, comme la récupération la plus lente, comme en témoigne le nombre plus élevé de ponctions lombaires effectuées pendant une période plus longue, confirmant ainsi la concordance de ce marqueur avec le cours de la maladie chez les autres survivants. Chez les patients qui se sont rétablis, la clairance des protéines s’est produite avant que les autres paramètres du LCR ne reviennent aux valeurs normales, ce qui suggère donc que la clairance des protéines peut être effectivement le paramètre CSF le plus précoce capable de fournir un signe pronostique fiable et favorable distinct. En conséquence, en termes physiopathologiques, ces Les résultats suggèrent également que la perte neuronale peut effectivement cesser avant que les niveaux de marqueurs inflammatoires ne diminuent à des niveaux normaux. Bien que les techniques permettant la quantification de la protéine dans le LCR soient normalisées, les recherches effectuées jusqu’à présent Le CSF a été fabriqué uniquement à des fins de diagnostic, et, par conséquent, le dosage des protéines n’a jusqu’à présent été normalisé que pour une réponse catégorique positive ou négative priligy achat. Néanmoins, sur la base des résultats présentés ici, le simple « on-off » « Signal fourni par le test dans la surveillance des dommages neuronaux dans la méningite bactérienne purulente soutient la considération du test – protéine comme un marqueur neuropathologique à ajouter au panel de paramètres CSF conventionnels